不同厂家COVID-19抗原检测试剂测试情况-技术专题

自COVID-19疫情发生以来，万渤生物密切跟踪相关研究动向。继COVID-19抗体检测后，抗原检测的工作也告一段落，在及时整理后第一时间发布。

      以下为不同产品对重组抗原，培养抗原的对比检测结果：

 1.选取不同来源的covid-19快速检测产品，对比检测不同的重组抗原及培养抗原。

 2.每种产品检测样品设置：配套的裂解液，用裂解液配制的重组抗原及培养抗原。

  具体如下：

 （1）抗原甲：重组N蛋白，含NTD单体，CTD单体

 （2）抗原乙：重组N+S蛋白，含NTD单体，CTD单体，RBD

 （3）抗原丙：重组N蛋白，含NTD单体，CTD二聚体

 （4）裂解液

 （5）培养物甲：灭活covid-19培养物1

 （6）培养物乙：灭活covid-19培养物2

 （7）培养物丙：灭活covid-19培养物3,精纯（已100倍稀释）

   注：雅培试剂检测培养物丙（稀释倍数为1万倍），检测结果为G3。

以上为此次主要对照厂家产品，因为篇幅原因，测试结果不理想的试剂未发布。

    实验结果可结合高福院士团队在国际权威学术期刊The EMBO Journal上在线发表了题为：“Structuresof the SARS-CoV-2 nucleocapsid and their perspectives for drug design”（新冠病毒N蛋白结构及药物设计展望）的文章进行分析总结。

文章链接：https://www.embopress.org/doi/full/10.15252/embj.2020105938

  SARS-CoV-2属于冠状病毒科，为不分节段的单股正链RNA病毒。它编码两个大的重叠开放阅读框（ORF1a和ORF1b），4种结构蛋白（S、E、M和N蛋白），以及9种辅助蛋白。其中，N蛋白是病毒粒子的核心成分，它与病毒基因组RNA结合，将RNA包装成核糖核蛋白（RNP）复合体。除了组装外，N蛋白还在病毒mRNA转录和复制中发挥重要作用，并参与免疫调节。有研究报道N蛋白可以与双链RNA结合而具有RNAi抑制活性，可以对抗宿主RNAi介导的抗病毒反应，同时，N蛋白还可诱导感染后的体液和细胞免疫应答，使其成为早期快速诊断和疫苗研发的关键靶标。SARS-CoV-2 N蛋白全长419个氨基酸，由N端结构域（NTD）和C端结构域（CTD）以及连接两个结构域及其两侧的三段无规则柔性区（IDR）构成。该文章中，研究人员解析了NTD和CTD蛋白分别为1.8 Å和1.5 Å的高分辨率晶体结构。其中NTD为单体，而CTD形成同源二聚体，NTD和CTD都含有较为保守的结合RNA的正电荷分布区域。与其它感染人的冠状病毒N蛋白结构比较，发现尽管整体结构相似性很高，但仍有其特殊性，如有些区域呈现不同的表面电荷分布规律，推测这些差异可能会影响其与RNA的结合效率。抗原性的差异也为开发特异性的靶向N蛋白的免疫快速诊断方法提供了理论依据。

  开发针对冠状病毒N蛋白的小分子抑制剂，目前主要有两个策略，一是靶向NTD的RNA结合位点，通过阻断N蛋白与RNA的结合从而抑制病毒组装；二是阻断N蛋白寡聚进而抑制RNP形成，或诱导N蛋白异常聚集从而干扰其正常组装。基于这两种策略，已有报道开发出有效抑制其它感染人冠状病毒如HCoV OC43及MERS-CoV的抗病毒小分子抑制剂，如PJ34和5‐苄氧基芦竹碱（5-benzyloxygramine，P3）。本项研究中，通过比较分析，发现小分子与其N蛋白的相互作用位点在SARS-CoV-2 N蛋白的相应位点也相对保守，暗示小分子可能对SARS-CoV-2依旧有效，表明进一步优化开发广谱性抑制剂前景可期，该研究也为抗新冠病毒药物的设计和优化提供了结构基础。